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武汉大学
Received:13 August 1986,
Published:1987-05
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Shengyan Feng, Guanying Qiu. Research on the method of DNA-DNA hybridization on nitrocelluose membrane with 35S-α-dATP[J]. Nuclear techniques, 1987, 10(5): 46-47,51,63.
随着分子生物学的发展,用cDNA探针检测核酸特异序列的分子杂交技术的应用日益广泛,
32
P、
3
H及
125
I的标记化合物被用于标记DNA和分子杂交已有多年。将
35
S取代与磷酸结合的氧原子而成的
35
S标记核苷酸类似物是近年开发的新技术
[1]
。由于
35
S发射的β射线能量适中(0.167MeV),防护比
32
P容易,探测比
3
H方便,故用作常规放射自显影比
32
P、
3
H都优越;加之
35
S半衰期适中(87天),示踪剂的比活性可比
3
H、
14
C都高得多,故制备的探针寿命比
32
P长得多;而废物处理也较
3
H和
14
C容易。诸此等等使
35
S标记的各类核苷酸在分子生物学研究中具有明显的优点。最近中科院上海原子核所和中科院上海生化所联合制备了
35
S-α-dATP,这为国内分子生物学研究中
35
S标记物的应用提供了良好的条件。确认国产
35
S-α-dATP用于切口转译的可行性,摸清
35
S-α-dATP用于膜上DNA与DNA杂交的反应特点和探测条件无疑是有意义的。
This paper describes the feasibility of DNA-DNA hybridization on nitrocelluose membrane with home made
35
S-α-dATP and its detection method.
褚红 , 核技术 , 1 , 封三 ( 1984 )。
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